温州蜜柑萎缩病毒小外壳蛋白基因克隆与原核表达及其抗体制备

编号 zgly0001420081

文献类型 期刊论文

文献题名 温州蜜柑萎缩病毒小外壳蛋白基因克隆与原核表达及其抗体制备

作者 武改霞  李婷婷  孙现超  青玲 

作者单位 西南大学植物保护学院植物病害生物学重庆市高校级重点实验室  国家柑桔工程技术研究中心中国农业科学院柑桔研究所 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S436.66 

关键词 柑橘  温州蜜柑萎缩病毒  小外壳蛋白  原核表达  抗体 

文摘内容 用RT-PCR方法,从采自重庆奉节的‘宫本’柑橘的2个样品中扩增出温州蜜柑萎缩病毒(Satsuma dwarf virus,SDV)SDV RNA2的3′末端,长度为975bp,与报道的SDV S-58 3′末端序列同源性分别为98.7%和98.4%。根据获得的序列设计引物,以含有SDV FJ 3′末端序列的质粒为模板,PCR扩增获得大小为654bp的SDV-FJ小外壳蛋白(Small coat protein,CPS)基因产物。构建了CPS与GST融合表达载体PGEX-CPS,在37℃、1.0 mmol·L-1IPTG条件下诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明成功表达出分子量约为42kD的GST-CP融合蛋白。以表达的融合蛋白为抗原免疫家兔,制备的抗血清的效价为1/12 800。用获得的抗体进行组织印迹分析表明,SDV在柑橘叶柄基部韧皮部维管束区域含量最高。