栽培草莓果实中特异表达的bHLH78基因的克隆及过量表达载体构建

编号 zgly0001478515

文献类型 期刊论文

文献题名 栽培草莓果实中特异表达的bHLH78基因的克隆及过量表达载体构建

作者 豆玉娟  曹飞  马跃  李贺  刘月学  张志宏 

作者单位 沈阳农业大学园艺学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2014年03期

年份 2014 

分类号 S668.4 

关键词 bHLH78  草莓  基因克隆  实时定量PCR  过量表达载体 

文摘内容 根据二倍体野生森林草莓(Fragaria vesca)预测的bHLH78-like基因序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术从八倍体栽培凤梨草莓(Fragaria×ananassa)品种‘幸香’果实中克隆出FabHLH78基因全长CDS。测序和分析结果表明,FabHLH78基因的CDS全长1 653 bp,编码550个氨基酸残基,在线软件Compute pI/Mw分析编码的蛋白质理论分子量约为59.6 kD、等电点(pI)6.17,经软件DNAMAN分析,核酸序列和氨基酸序列与二倍体草莓FvbHLH78-like基因的一致性分别为98.31%和96.55%。利用半定量PCR检测FabHLH78基因在草莓根、匍匐茎、叶、果实中的表达情况,发现其只在果实中特异表达;实时定量RT-PCR结果显示随着果实发育FabHLH78基因表达量逐渐增加。FabHLH78全长CDS被整合到植物表达载体pRI101-AN上,构建出FabHLH78基因的过量表达载体pRI101-bHLH78,为进一步验证FabHLH78基因的功能奠定了基础。