甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析

编号 zgly0001669698

文献类型 期刊论文

文献题名 甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析

作者 李旭娟  林秀琴  字秋艳  李纯佳  徐超华  吴转娣  朱建荣  刘洪博  方志存  刘新龙 

作者单位 云南省农业科学院甘蔗研究所/云南省甘蔗遗传改良重点实验室  屏边苗族自治县农业和科学技术局 

母体文献 植物遗传资源学报 

年卷期 2019年03期

年份 2019 

分类号 S566.1 

关键词 甘蔗  ScMOC1启动子  克隆  瞬时表达分析 

文摘内容 MOC1属于植物特有的GRAS家族蛋白基因,是调控植物腋芽形成发育的关键基因。启动子对基因转录效率起直接调控作用,其功能分析可以精确定位基因的表达部位、发育阶段和调控机制,克隆甘蔗腋芽形成发育关键基因ScMOC1的启动子序列,研究其功能对该基因表达调控机制具有重要意义。本研究以我国主栽甘蔗品种新台糖22号(ROC22)的基因组DNA为模板,通过基因组步移和巢式PCR技术克隆到ScMOC1起始密码子ATG上游1874 bp的启动子序列。PlantCARE在线分析预测表明,该序列包含多个真核生物启动子必需的核心元件TATA-box、CAAT-box以及与光响应、激素响应和分生组织表达等相关的顺式作用元件,推测ScMOC1启动子可通过激素诱导调控ScMOC1表达,且该启动子可能通过分生组织表达顺式调控元件CAT-box参与ScMOC1对甘蔗分蘖的调控。将获得的启动子序列替换pBI121质粒中的CaMV35S启动子驱动下游GUS基因表达进行活性分析,结果表明:本研究克隆的启动子片段能驱动GUS基因在甘蔗嫩叶中瞬时表达。5′缺失分析表明该启动子的基础启动子序列在起始密码子ATG上游350～500 bp之间。该结果为后续ScMOC1的调控机制研究奠定了良好的基础。