百山祖冷杉SSR体系的建立及人工辅助授粉子代的初步鉴定

编号 zgly0000689936

文献类型 期刊论文

文献题名 百山祖冷杉SSR体系的建立及人工辅助授粉子代的初步鉴定

作者 林二培  马海泉  樊民亮  骆文坚  黄华宏  童再康 

作者单位 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地  浙江省庆元县林业局 

母体文献 浙江农林大学学报 

年卷期 2011,28(2)

页码 234-240

年份 2011 

分类号 S722.3 

关键词 林木育种学  SSR标记  反应体系  百山祖冷杉 

文摘内容 应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA,建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析。结果表明: 在20.00μL反应体系中,模板DNA用量、镁离子(Mg2+)浓度、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别是60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)时结果最好。随机挑取其中1对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,序列经比对后得到的一致性值达到94%,表明其他杉科植物的SSR引物可以在百山祖冷杉中应用。通过引物筛选,得到15对引物可在百山祖冷杉中扩增得到多态性条带,其中4对引物扩增得到的部分片段在百山祖冷杉和日本冷杉Abies firma间有明显区别。这些结果表明,利用SSR分子标记技术能够用于百山祖冷杉人工辅助授粉子代的初步鉴定。