小鼠和奶牛乳腺上皮细胞的分离及培养特性比较

编号 zgly0001487557

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠和奶牛乳腺上皮细胞的分离及培养特性比较

作者 刘玉辉  赖金伦  寇明明  邓明亮  刘瑞宁  陈颖钰  胡长敏  郭爱珍 

作者单位 华中农业大学动物医学院  华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年12期

年份 2015 

分类号 S852.2 

关键词 小鼠乳腺上皮细胞  奶牛乳腺上皮细胞  分离  培养  生长特性 

文摘内容 为建立小鼠乳腺上皮细胞(MMECs)及奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)分离培养体系,并比较其生长特性。分别无菌采集健康妊娠后期昆明鼠及泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺组织,采用改良混合酶消化结合差速贴壁法分离原代MMECs及BMECs,并进行细胞角蛋白18的免疫荧光鉴定;通过细胞形态跟踪观察评价传代、冻存和复苏后MMECs及BMECs生物学特性;连续培养及细胞计数绘制MMECs及BMECs生长曲线。结果显示,从小鼠和奶牛乳腺组织分离的目的细胞,经角蛋白18免疫荧光鉴定证实为MMECs及BMECs;汇合的单层MMECs多角形,呈铺路石样外观,BMECs呈鹅卵石样;MMECs在传至第2代时细胞特有形状消失,而BMECs传至第9代时仍保持其鹅卵石样外观;MMECs只能复苏冻存原代细胞,传代BMECs均可冻存和复苏。采用改良混合酶消化结合差速贴壁法可获得高纯度的MMECs和BMECs,两种细胞在生长培养特性上存在显著差异。