铁皮石斛蔗糖合成酶基因的克隆及表达分析

编号 zgly0000775767

文献类型 期刊论文

文献题名 铁皮石斛蔗糖合成酶基因的克隆及表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 孟衡玲  段承俐  萧凤回  杨生超  查应红  文国松 

作者单位 云南农业大学中药材研究所/云南省中药材规范化种植技术指导中心  浙江农林大学林业与生物技术学院 

母体文献 中国中药杂志 

年卷期 2011,36(7)

页码 833-837

年份 2011 

分类号 R714.56 

关键词 铁皮石斛  蔗糖合成酶  基因克隆  表达分析 

文摘内容 目的: 克隆铁皮石斛Dendrobium officinale蔗糖合成酶基因并对其表达分析,为研究铁皮石斛多糖合成与蔗糖合成酶活性关系及调控表达提供理论依据。 方法: 基于GenBank上已知的蔗糖合成酶基因SS同源序列,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛蔗糖合成酶基因全长,将目的片段转化大肠杆菌表达菌株BL21中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析。 结果: 成功克隆了铁皮石斛蔗糖合成酶基因,该基因cDNA全长2 424 bp,编码807个氨基酸 (命名为DOSS1),登录号HQ856835,该基因氨基酸序列与兰科植物Mokara yellow(AF530568)同源性达到95%,与Oncidium goldiana(AF530567)同源性达到90%,与禾本科植物的SS基因同源性在80%以上。并对其进行大肠杆菌原核表达诱导,诱导的工程菌能明显表达出一条相对分子质量约为92×103左右的蛋白质,与理论相对分子质量基本相符。 结论: 成功克隆了铁皮石斛蔗糖合成酶基因,并诱导出一条与理论蛋白相对分子质量相符的蛋白条带。