小峰熊蜂蜂毒磷脂酶A2基因的克隆及表达分析

编号 zgly0001459766

文献类型 期刊论文

文献题名 小峰熊蜂蜂毒磷脂酶A2基因的克隆及表达分析

作者 高丽娇  黄家兴  吴杰 

作者单位 中国农业科学院蜜蜂研究所  农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2013年09期

年份 2013 

分类号 S896.5 

关键词 小峰熊蜂  磷脂酶  基因克隆  序列分析  基因表达 

文摘内容 磷脂酶A2（phospholipase A2,PLA2）是蜂毒主要成分,也是蜂毒的主要过敏原,在熊蜂个体和群体防御方面具有重要功能。为了探究熊蜂A2基因的生物学功能,本研究以小峰熊蜂Bombus hypocrita为材料进行了蜂毒PLA2基因的克隆、鉴定了与表达特性分析。结果表明:该基因全长为2 272 bp,GenBank登录号为KF214771,由4个外显子和3个内含子组成,编码区（CDS）长为543 bp,共编码180个氨基酸残基。氨基酸序列相似分析显示,成熟的小峰熊蜂PLA2（含有136个氨基酸）与其他蜂类PLA2的氨基酸序列相似性较高,均包含10个保守的半胱氨酸残基、1个保守的Ca2+结合位点和1个酶活性中心。基于PLA2氨基酸序列的系统进化树分析表明,熊蜂属Bombus与蜜蜂属Apis在不同分支上,属单系群,且蜜蜂属分化较早。荧光定量PCR结果表明,PLA2基因在小峰熊蜂各日龄均有表达,且随日龄增长,表达量呈先上升后下降的趋势,10日龄时出现峰值,其表达量显著高于其他日龄（P<0.05）。半定量PCR结果表明,PLA2基因在毒腺、卵巢、中肠中表达量较高,在足、触角、食道腺中表达量较低,在脂肪体、肌肉、神经、气管、复眼、脑中未表达。本研究探明了小峰熊蜂PLA2的基因结构及其表达特性,丰富了熊蜂PLA2的生物学基础,为进一步深入研究熊蜂PLA2生物学功能和作用机制以及开发蜂毒生物制剂等鉴定了基础。