大豆实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

编号 zgly0001721165

文献类型 期刊论文

文献题名 大豆实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

作者 张芷睿  张耀华  王秋实  于慧  杨素欣 

作者单位 中国科学院东北地理与农业生态研究所大豆分子设计育种重点实验室  中国科学院大学 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2020年09期

年份 2020 

分类号 S565.1 

关键词 大豆  内参基因  发育时期  实时荧光定量PCR 

文摘内容 选择合适的内参基因可以提高定量分析中目标基因表达的准确性。本研究选取大豆(Glycine max)不同发育时期的18个组织样本,利用实时荧光定量PCR技术,分析了大豆60S、ABC、ACT2/7、ACT11、CYP2、ELF1A、ELF1B、Fbox、G6PD、MTP、PEPKR1、TUB4、TUA5、UBC4等14个内参基因在不同组织中表达量的变化,并利用geNorm、NormFinder和BestKeeper三种软件对各基因在四个重要发育时期以及在叶片组织中的表达稳定性进行了评价。研究表明:大豆内参基因Fbox、ABC、G6PD和ACT11分别为出苗期(VE)、第一片三叶期(V1)、始花期(R1)和初荚期(R3)最稳定的内参基因; 60S为叶片组织中最稳定的内参基因;在全部样本的整体评价中, Fbox为最稳定的内参基因。此外,通过分析大豆噻唑合成酶基因GmPGL1的表达量,进一步证明了内参基因筛选结果的可靠性和在大豆基因表达分析中的适用性。本研究为准确定量分析大豆关键发育时期不同组织中的基因表达提供参考基因。