家蚕细胞色素P450 CYP337A1的原核表达

编号 zgly0001339238

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕细胞色素P450 CYP337A1的原核表达

作者 董元凌  艾均文  柳照应  张湖静  李傲祥  朱勇 

作者单位 西南大学生物技术学院  西南大学生物技术学院 重庆400716  重庆400716 

母体文献 中国蚕业 

年卷期 2008年02期

年份 2008 

分类号 Q78 

关键词 家蚕  细胞色素P450  CYP337A1  原核表达 

文摘内容 以含有CYP337A1基因完全编码框的克隆载体质粒DNA为模板进行PCR扩增,产物经TA克隆测序鉴定后,亚克隆至原核融合表达载体PET50(b)(含有编码64.3 kD的Nus.Tag蛋白标签)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达。利用SDS-PAGE方法,以空载和未诱导菌体作对照,对细菌总蛋白进行电泳分析,结果表明:经1mmol/L IPTG诱导2h后,即能看到1条大约120 kD的蛋白质特异带,与预计大小一致。进一步利用不同时间、不同温度以及不同浓度的IPTG进行诱导结果比较,发现在诱导时间为2h,温度为32℃,IPTG浓度为0.6 mmol/L的诱导条件下,融合蛋白表达量最大。该实验为利用该基因的蛋白产物进行功能分析创造了条件。