刺参基因组DNA的提取及RAPD条件的优化

编号 zgly0000503934

文献类型 期刊论文

文献题名 刺参基因组DNA的提取及RAPD条件的优化

作者 常林瑞  孙振兴  李莉  李云玲 

作者单位 鲁东大学生命科学学院  中国海洋大学生命科学学院 

母体文献 湖北农业科学 

年卷期 2007,46(1)

页码 18-20

年份 2007 

分类号 Q959.269.2  Q781 

关键词 刺参  DNA提取  随机扩增多态性DNA  优化 

文摘内容 以野生刺参为试验材料, 探索了刺参基因组的提取方法, 并对影响RAPD反应的各因素进行了优化, 建立了刺参的优化反应体系和程序。反应体系总体积为25μL, 各组分的含量为10倍缓冲液2.5μL, Mg^2+(20mmol·L^-1)3μL, TaqDNA聚合酶(1U·μL^-1)1.5μL, dNTPs(10mmol·L^-1)2.5μL, 随机引物(5pmol·μL^-1)1μL, 模板DNA(40ng·μL^-1)2.5μL。PCR循环程序为96℃变性5min; 94℃变性0.5min, 36℃退火1min, 72℃延伸1min, 35个循环; 最后72℃延伸10min。