Gal80ts与Gal4组合灵敏控制果蝇中UAS转基因的表达水平

编号 zgly0001528304

文献类型 期刊论文

文献题名 Gal80ts与Gal4组合灵敏控制果蝇中UAS转基因的表达水平

作者 李开霞  马恩波  张建珍  赵一丹  张徐波 

作者单位 山西大学应用生物学研究所  山西大学生命科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2016年05期

年份 2016 

分类号 Q78 

关键词 黑腹果蝇  Gal4/UAS系统  Gal80ts  UAS转基因  基因表达水平  荧光强度 

文摘内容 【目的】Gal80ts与Gal4组合驱动UAS转基因表达是黑腹果蝇Drosophila melanogaster研究中常用的转基因过表达遗传学工具,通过温度控制实现对UAS转基因表达的灵活开关。Gal80ts是一种温度敏感型蛋白,低温下（18℃）与Gal4蛋白结合并抑制其转录活力,高温下（29℃）解除对Gal4的抑制,从而允许Gal4结合UAS位点,启动UAS转基因的表达。但是从1829℃的开关只能强烈过表达UAS转基因,而不能灵活调控转基因的表达水平。本实验系统研究一系列温度下转基因的表达水平,从而实现该体系对转基因的表达水平的灵活控制。【方法】以果蝇翅芽这一常用器官组织为研究模型,以2种Gal4品系（dpp-Gal4和en-Gal4,分别由decapentaplgic和engrailed基因的启动子驱动）分别与tub-Gal80ts（微管蛋白基因tubulin启动子驱动）基因重组后,再分别与UAS-wg（wingless）转基因品系杂交;在一系列温度（18,25,27.5,28,28.5和30℃）下进行子代幼虫培养,通过免疫组化染色揭示并量化分析转基因wg在3龄幼虫翅芽上的表达水平。【结果】1825℃培养条件下,Gal80ts与Gal4组合系统中的UAS转基因不能表达;30℃时培养,转基因强烈地过表达;在2530℃区间内,随着温度升高,转基因表达水平逐渐上升。【结论】在2530℃之间的温度调控可以实现对Gal80ts与Gal4组合系统中的UAS转基因表达水平的调控。本研究结果对调控转基因表达程度有重要价值。