油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析

编号 zgly0000823293

文献类型 期刊论文

文献题名 油松苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建及表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 魏宁  樊军锋  徐华 

作者单位 西北农林科技大学林学院  陕西省林业厅 

母体文献 西北林学院学报 

年卷期 2013(5)

页码 95-99

年份 2013 

分类号 S791.254 

关键词 油松  苯丙氨酸解氨酶  原核表达  分析 

文摘内容 利用基因重组技术, 以油松PAL基因(TaPAL)CDS区(2157bp)作为外源基因的同源重组片段, 构建了pET-28a—TaPAL重组表达载体, 在大肠杆菌BL21(DE3)中融合表达并进行分析。经SDS—PAGE电泳检测, 在分子量80KD处获得一条特异蛋白的表达条带, 且其大小与预期相符。在温度28℃, IPTG浓度1.5mm01.L-1, 时间3h条件下, 重组质粒的表达量最大。可溶性分析表明, 在最佳诱导条件下, 该蛋白主要以包涵体形式存在。粗酶活性测定表明, 粗酶(在20℃、IPTG浓度1mm01.L。条件下诱导10h)比活力为55.3tool·min-1·gpro-1, 即55.3U·g。构建的pET-28a—TaPAL重组载体能够在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出具有生物活性的融合蛋白。