犊牛睾丸支持细胞的分离与冷冻保存

编号 zgly0001423412

文献类型 期刊论文

文献题名 犊牛睾丸支持细胞的分离与冷冻保存

作者 孙秀娟 

作者单位 黑龙江农垦科技职业学院 

母体文献 中国草食动物科学 

年卷期 2012年04期

年份 2012 

分类号 S823.3 

关键词 犊牛  睾丸支持细胞  体外培养  冷冻保存 

文摘内容 以新生犊牛睾丸为实验对象,应用组合酶法进行支持细胞分离培养,并研究了冷冻保存后支持细胞的生长特性。结果表明:在细胞分离时,消化睾丸组织,分离曲细精管法所获得的细胞悬液中的有效细胞数高于组织剪碎法。支持细胞体外培养,4 h后开始贴壁,3~4 d铺满培养皿底壁,传代后细胞生长较快,2 d即可增殖一代。HE染色,胞质染色较淡,而细胞核染色较深,呈圆形或椭圆形位于细胞质中央或偏位,核仁明显。采用10%FBS+10%DMSO的DMEM液做冷冻液,对细胞进行冷冻保存时,支持细胞的复苏率在65%以上。解冻后的支持细胞体外培养,4h开始有细胞贴壁,24h后大部分细胞贴壁,3~4d铺满培养皿底壁。