绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究

编号 zgly0001743500

文献类型 期刊论文

文献题名 绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究

作者 栾兆进  赵勇超  宋慧子  张家新 

作者单位 内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室  包头医学院基础医学与法医学院 

母体文献 西北农林科技大学学报:自然科学版 

年卷期 2022,50(8)

页码 8-14

年份 2022 

分类号 S826.1 

关键词 绵羊  附睾上皮细胞  谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)  抗氧化能力 

文摘内容 【目的】利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)探究谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)的抗氧化功能。【方法】体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用。筛选合成3条GPX5的siRNA序列(siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3),同时随机设计一段不与GPX5重合的扰码(scramble)序列(siRNA-NC),采用瞬时转染法转染EECs,以正常的EECs为对照(CK),于转染34 h后取样,从mRNA和蛋白水平检测GPX5的干扰效果。采用CCK-8法检测GPX5干扰组、siRNA-NC组和CK组EECs的增殖能力,采用DCFH-DA探针法检测其活性氧(ROS)水平,采用TBA法检测其丙二醛(MDA)水平,采用免疫荧光法检测其8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。【结果】分离培养的细胞可与角蛋白18(CK18)特异性抗体反应,表明细胞为EECs,可用于后续试验。siRNA-N.3(即siRNA-GPX5)对EECs GPX5 mRNA和蛋白表达的干扰效果最优,可用于后续试验。随着过氧化氢(H_(2)O_(2))处理浓度的增加,与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs的增殖能力持续下降。与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs中的ROS和MDA水平分别极显著(P《0.01)和显著(P《0.05)升高,8-OHdG水平明显上升。【结论】GPX5可以有效保护绵羊EECs,使其免受脂质过氧化损伤及DNA氧化损伤。