编号 zgly0000650011
文献类型 期刊论文
文献题名 提取航天诱变向日葵种子总RNA的一种有效方法
学科分类 220.20;森林培育学
作者单位 西华师范大学生命科学学院 西华师范大学珍稀动植物研究所
母体文献 生物技术通讯
年卷期 2011,22(1)
页码 89-92
年份 2011
分类号 Q78
关键词 RNA提取 向日葵 航天诱变 多酚 多糖
文摘内容 目的: 从航天诱变向日葵种子中提取高质量的总RNA。方法: 采用改进的SDS法,提取缓冲液与氯仿同时作用液氮研磨材料后,用酸酚-氯仿抽提一次,经LiCl过夜沉淀、DNaseⅠ处理、1/2体积的无水乙醇沉淀多糖,最后加入1/10体积的醋酸钠和2倍体积的无水乙醇沉淀总RNA,用琼脂糖凝胶电泳与紫外分光光度法测定产量与纯度,用PT-PCR鉴定RNA的质量。结果: 提取的RNA电泳条带清晰,D260nm/D230nm、D260nm/D280nm值分别为2.09、2.00,其产量为35.30μg/100 mg,用PT-PCR能扩增出肌动蛋白基因片段。结论: 采用该方法提取的总RNA纯度高、完整性好,适于进一步的分子生物学研究