菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因同源片段的克隆与序列分析

编号 zgly0000404857

文献类型 期刊论文

文献题名 菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因同源片段的克隆与序列分析

作者 刘振林  尹伟伦  戴思兰 

作者单位 北京林业大学园林学院  北京林业大学生物科学与技术学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2006,4(1)

页码 35-40

年份 2006 

分类号 S511  Q78 

关键词 菠菜  BADH基因例源片段  克隆 

文摘内容 在盐和干旱等渗透胁迫条件下, 一些植物会积累甘氨酸甜菜碱(简称甜菜碱)作为渗透调节物质, 甜菜碱在植物体内由胆碱经两步氧化形成, 催化这两步反应的酶分别是胆碱单氧化物酶(choline monooxygenase, CMO)和甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase, BADH)。由于甜菜碱的合成途径简单, 进行遗传操作方便, 在诸多抗逆性基因中甜菜碱合成酶基因被看作是最有希望的胁迫抗性基因。其中, BADH基因的全长cDNA序列首先被从藜科植物菠菜(spinacia oleracea)中克隆到, 此后人们相继以该基因为参照, 研究其它植物中的BADH基因。本文作者在以菠菜BADH基因为对照研究菊科植物的BADH基凶时, 根据已发表BADH基因的保守区序列设计了一对PCR兼并引物, 以菠菜基因组DNA为模板, 采用PCR法扩增出长分别为825bp(seq1)和822bp(seq2)的两个DNA片段, 经测序和序列分析, seql与GenBank中登录的菠菜BADH基因的基凶组序列(U69142)一致, 其外显子区与己发表的该基凼的cDNA序列(M31480)一致, seq2与U69142序列的例源性为68%, 其外显子区与M31480序列的同源性为83.93%。而且, 在由该核苷酸序列推导的氨基酸序列中, 含有醛脱氢酶高度保守的十肽VTLELGGKSP, 说明该基因为菠菜BADH基因的吲源基因。根据现有文献分析, 菠菜中可能存在两个BADH的同工酶, 作者所克隆基因片段所属的基因可能编码菠菜BADH的另一个民工酶。该序列已在GenBank中登录, 登录号: DQ070842。