编号
zgly0001400573
文献类型
期刊论文
文献题名
牛GM-CSF与金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB共表达质粒的构建与原核表达
作者单位
内蒙古农业大学兽医学院
母体文献
动物医学进展
年卷期
2011年10期
年份
2011
分类号
S858.23
关键词
金黄色葡萄球菌
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
纤连素结合蛋白B
重叠延伸PCR克隆
原核表达
文摘内容
采用PCR方法对牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和金黄色葡萄球菌FnBPB的D区进行特异性的扩增,并通过重叠延伸PCR扩增GM-CSF-FnBPB串联基因,构建了克隆质粒pMD19-GM-CSF-FnBPB。利用表达载体pET-32a(+)对该融合基因片段进行原核表达,SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导浓度下,在39ku处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明,该蛋白具有反应原性,进而证明该融合基因成功在原核细胞中表达。