PcDNA3.0-hVEGF165的构建及转染骨髓源性血管内皮祖细胞的体外研究

编号 zgly0000503827

文献类型 期刊论文

文献题名 PcDNA3.0-hVEGF165的构建及转染骨髓源性血管内皮祖细胞的体外研究

作者 于小滨  李晓强  孟庆友 

作者单位 苏州大学附属第二医院血管外科 

母体文献 中国心血管病研究杂志 

年卷期 2007,5(2)

页码 141-143

年份 2007 

分类号 Q95-33 

关键词 内皮  血管  内皮生长因子  内皮干细胞  基因  转染 

文摘内容 目的构建hVEGF165真核表达载体, 进行血管内皮生长因子(vEGF)转染骨髓源性血管内皮祖细胞(EPC)的体外基础研究。方法设计引物后ECV304细胞克隆基因, 构建真核表达型的PcDNA3.0-hVEGF165。EGM-2MV培养基培养大鼠骨髓中的单个核细胞, 免疫细胞化学及电镜鉴定EPC, 脂质体介导PcDNA3.0-hVEGF165转染EPC, 转染后ELISA法检测培养上清中VEGF蛋白水平, MTr法评价VEGF转染EPC后对细胞活性的影响。结果构建真核表达型的PcDNA3.0-hVEGF165成功, EGM-2MV培养出的大鼠骨髓EPC能表达CD34、CD133、FIX-1等特征性的细胞表面标志, 脂质体介导PcDNA3.0-hVEGF转染EPC能表达较高浓度的VEGF蛋白水平, VEGF转染后对EPC的增殖无影响。结论脂质体介导PcDNA3.0-hVEGF165转染EPC后能表达一定浓度的VEGF蛋白, 并对EPC的活性无明显影响。