柑桔溃疡病菌实时荧光定量PCR检测与应用

编号 zgly0001322349

文献类型 期刊论文

文献题名 柑桔溃疡病菌实时荧光定量PCR检测与应用

作者 殷幼平  黄冠军  赵云  刘洪  王中康 

作者单位 重庆市基因功能及调控重点实验室重庆大学生物工程学院  重庆市农业技术推广总站植保植检站  重庆市基因功能及调控重点实验室重庆大学生物工程学院 重庆400030  重庆400030  重庆400020 

母体文献 植物保护学报 

年卷期 2007年06期

年份 2007 

分类号 S436.66 

关键词 柑桔溃疡病菌  定量PCR  荧光染料  TaqMan探针  检测 

文摘内容 根据地毯草黄单孢Xac306菌株(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac306)已知全基因组中独有蛋白基因序列设计的特异性引物对和探针,建立并优化SYBR Green I(SGI)荧光染料和Taq-Man探针实时荧光定量PCR检测体系,用于柑桔溃疡病早期诊断鉴定。结果表明,建立的两种定量PCR体系均能特异地检出Xac的细胞和其基因组DNA,而对其它测试的植物病原菌和柑桔表面的腐生黄单孢菌都不能检出。SGI法和TaqMan探针法对Xac细菌悬浮液的检测灵敏度均可达到1~5个细菌/反应,对Xac靶标片段DNA的检测灵敏度可达1fg/μL。两种定量PCR检测方法比常规PCR灵敏度高2~3个数量级。对田间采集的328个柑桔显症、疑似症状和无症带菌材料富集培养样品进行了实际检测,结果表明,实时荧光PCR适合柑桔无症带菌样品的早期检测。