鹿结核分枝杆菌流行株Rv3874-Rv3875融合基因的克隆及原核表达

编号 zgly0001477534

文献类型 期刊论文

文献题名 鹿结核分枝杆菌流行株Rv3874-Rv3875融合基因的克隆及原核表达

作者 曾范利  王文玉  宋纪伟  时坤  李健明  刘东旭  刘杨  杜锐 

作者单位 吉林农业大学中药材学院  吉林农业大学动物科学技术学院  吉林市人民医院  教育部动物生产及产品质量安全重点实验室  吉林省药用动物二级实验室 

母体文献 经济动物学报 

年卷期 2014年04期

年份 2014 

分类号 S852.61 

关键词 鹿结核分枝杆菌  流行株  融合基因  克隆  原核表达 

文摘内容 以吉林农业大学经济动物疾病实验室分离并保存的鹿结核分枝杆菌流行株为模板,利用重叠延伸剪接技术(Splicing by overlap extension,SOE)设计引物,克隆Rv3874-Rv3875融合基因,构建重组表达质粒p GEX-4T-1-Rv3874-75,在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,并对目的蛋白进行纯化,表达产物通过SDS-PAGE和Western blot进行分析。结果表明:测序后融合基因Rv3874-Rv3875的序列与Gen Bank中序列的符合率为100%,重组表达质粒p GEX-4T-1-Rv3874-75在大肠杆菌中成功诱导表达,获得可溶性表达的融合蛋白,经SDS-PAGE分析该蛋白的相对分子质量约49 ku,经Western blot鉴定纯化好的融合蛋白能与鹿结核病的阳性血清发生反应,具有良好的反应原性。