应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B

编号 zgly0001677876

文献类型 期刊论文

文献题名 应用实时荧光定量RT-PCR高效检测葡萄病毒B

作者 任芳  张尊平  范旭东  胡国君  张梦妍  董雅凤 

作者单位 中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2019年04期

年份 2019 

分类号 S436.631.1 

关键词 葡萄  葡萄病毒B  实时荧光定量RT-PCR  常规RT-PCR 

文摘内容 本研究建立了葡萄病毒B的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR（RT-qPCR）检测技术。该技术标准曲线扩增效率102.4%,相关系数0.999,最低检测限达10-4倍稀释cDNA,灵敏度为常规RT-PCR的100倍。重复性试验组内和组间变异系数分别为0.00%～0.65%和0.02%～2.00%,表明检测稳定性好。该技术对田间葡萄样品检测适用范围广,对枝条和老叶柄检测效果最好,冬季枝条和春夏秋季所有老叶柄样品检出率均为100%,与常规RT-PCR检测结果一致。对于其他季节或部位样品,RT-qPCR检出率（43%～74%）则普遍高于常规RT-PCR（5%～71%）,特别是春季样品和春夏秋季所有嫩叶样品,检出率比常规RT-PCR分别高31%和38%。对来自我国13个省21个品种的52份田间葡萄样品检测结果表明,RT-qPCR共检测到6个样品为阳性,检出率11.5%,为常规RT-PCR（检出率5.8%）的2倍。