利用原核表达系统制备家蚕非典型嗅觉受体Orco抗原蛋白

编号 zgly0000952786

文献类型 期刊论文

文献题名 利用原核表达系统制备家蚕非典型嗅觉受体Orco抗原蛋白

作者 尹淑艳  杨春红  刘朝阳  于奇  高绘菊  崔为正  刘庆信 

作者单位 山东农业大学植物保护学院  山东农业大学林学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2015(11)

页码 1194-1200

年份 2015 

关键词 家蚕  原核表达  非典型嗅觉受体  Orco  抗原蛋白 

文摘内容 【目的】探索建立一种有效制备昆虫非典型嗅觉受体Orco抗原的方法,为Orco蛋白组织定位及功能研究奠定基础。【方法】设计带有Bam H I和Hind III酶切位点的引物,采用RT-PCR方法扩增家蚕Bombyx mori Orco第4-5跨膜区之间的基因片段,将其与原核表达载体p ET-28a(+)双酶切处理后进行连接,然后转化大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞DH5α,重组质粒再转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE检测诱导蛋白,用His Trap HP亲和层析对诱导表达的大量蛋白进行纯化。