落叶松-杨栅锈菌DNA提取新方法研究

编号 zgly0000383808

文献类型 期刊论文

文献题名 落叶松-杨栅锈菌DNA提取新方法研究

学科分类 220.3010;森林病理学

作者 余仲东  曹支敏 

作者单位 西北农林科技大学林学院 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2005,33(11)

页码 155-158

年份 2005 

分类号 S763.1 

关键词 落叶松-杨栅锈菌  DNA提取  二球法  聚合酶链反应 

文摘内容 对提取DNA“二球法”的一些步骤和提取成分进行了更新, 使得PCR反膻灵敏性显著增加。改进的内容包括: (1)在有二钢珠和1.6g/L Chelex的离心管中加入夏孢子, 夏孢子可以来自带有风十寄主叶肉组织的夏孢子堆; (2)在离心管中加入KOH而不是NaOH, 然后剧烈斡旋30min; (3)将离心管管底穿一小孔, 套上一新离心管, 短暂离心甩出内容物。用该方法得到的DNA可用作ITS-nrDNA-PCR, RAPD和SSR的底物。同时, 分析了PCR扩增中提取上液的稀释倍数, 发现RAPD和SSR扩增稀释倍数达到16倍以上有较好的反应结果。