落叶松-杨栅锈菌DNA提取新方法研究(英文)

编号 zgly0001291954

文献类型 期刊论文

文献题名 落叶松-杨栅锈菌DNA提取新方法研究(英文)

作者 余仲东  曹支敏 

作者单位 西北农林科技大学林学院  西北农林科技大学林学院 陕西杨凌712100  陕西杨凌712100 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2005年11期

年份 2005 

分类号 S763.13 

关键词 落叶松-杨栅锈菌  DNA提取  二球法  聚合酶链反应 

文摘内容 对提取DNA“二球法”的一些步骤和提取成分进行了更新,使得PCR反应灵敏性显著增加。改进的 内容包括:(1)在有二钢珠和1．6 g／L Chelex的离心管中加入夏孢子,夏孢子可以来自带有风干寄主叶肉组织的夏 孢子堆;(2)在离心管中加入KOH而不是NaOH,然后剧烈斡旋30 min;(3)将离心管管底穿一小孔,套上一新离心 管,短暂离心甩出内容物。用该方法得到的DNA可用作ITS-nrDNA-PCR,RAPD和SSR的底物。同时,分析了 PCR扩增中提取上液的稀释倍数,发现RAPD和SSR扩增稀释倍数达到16倍以上有较好的反应结果。