抗草甘膦基因GR79Mt表达载体的构建及拟南芥和苜蓿的遗传转化

编号 zgly0001478472

文献类型 期刊论文

文献题名 抗草甘膦基因GR79Mt表达载体的构建及拟南芥和苜蓿的遗传转化

作者 孙展  郑兴卫  李聪  苗丽宏 

作者单位 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2014年01期

年份 2014 

分类号 S541.9  Q943 

关键词 拟南芥  紫花苜蓿  载体构建草甘膦抗性  遗传转化 

文摘内容 为获得抗草甘膦苜蓿株系,本研究在抗草甘膦基因GR79Mt序列前加叶绿体转运肽基因CTP2序列,并在启动子和终止子两端分别加入PvuⅠ酶切位点,插入到载体pCAMBIA2300中,成功构建植物表达载体pCA-GM。采用CaCl2冻融法将其转入农杆菌中,进一步基于农杆菌介导法进行了目的基因的拟南芥和紫花苜蓿转化。经PCR和RT-PCR验证,目的基因已转入拟南芥中。本研究共得到12株苜蓿抗性苗,经PCR分析鉴定,其中两株转化成功,结果初步表明已将目的片段基因转入苜蓿中。本研究可为抗除草剂苜蓿的应用提供了种质资源和参考方法。