凡纳滨对虾Crustin-like基因的克隆及在副溶血弧菌感染条件下的表达分析

编号 zgly0000807175

文献类型 期刊论文

文献题名 凡纳滨对虾Crustin-like基因的克隆及在副溶血弧菌感染条件下的表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 张艳艳  刘小林  黄海洪  钱昭英  王宪宗  相建海 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室  中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2012(12)

页码 41-48

年份 2012 

分类号 S945.19 

关键词 凡纳滨对虾  Crustin-like基因  序列分析  副溶血弧菌  实时定量PCR 

文摘内容 【目的】:研究凡纳滨对虾Crustin-like基因(即CL基因)的结构和功能,探明CL基因是否参与副溶血弧菌侵染条件下的免疫应答,为进一步研究凡纳滨对虾的免疫机制和抗病育种奠定基础。【方法】:采用RT-PCR技术克隆凡纳滨对虾CL基因;用DNAstar、Clustalx、MEGA 5.0、PROSITE、TMpred和SignalP软件,分析CL基因序列及其蛋白结构,并预测蛋白功能;利用副溶血弧菌进行攻毒试验和实时定量PCR,检测CL基因在病原侵染条件下的表达情况。【结果】:克隆获得了凡纳滨对虾CL基因(登录号: JQ824114)的cDNA,全长为501bp,含有33bp的5′非翻译区(1～33bp)和24bp的3′非翻译区(478～501bp),编码区为444bp,共编码147个氨基酸;对CL蛋白结构及功能的分析表明,该蛋白编码蛋白质含有1个信号肽、1个跨膜螺旋和1个WAP结构域;攻毒试验表明,副溶血弧菌刺激可导致CL基因表达量的明显变化,总体呈现出先降低后升高的变化趋势。【结论】:克隆了凡纳滨对虾CL基因的全长,发现其与副溶血弧菌侵入后引发的免疫反应密切相关,可以作为副溶血弧菌感染前期诊断的参考指标。