SMART策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

编号 zgly0001373914

文献类型 期刊论文

文献题名 SMART策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

作者 赵桂媛  魏志刚  刘关君  张凯旋  刘桂丰  杨传平 

作者单位 东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2010年01期

年份 2010 

分类号 S792.11 

关键词 小黑杨  形成层  SMART  cDNA文库 

文摘内容 为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART(RNA转录过程中的5′末端转换机制)技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5～2.0kb之间,平均长度为1.12kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。