沙葱萤叶甲海藻糖合成酶基因GdTPS的克隆及对温度胁迫的响应

编号 zgly0001565105

文献类型 期刊论文

文献题名 沙葱萤叶甲海藻糖合成酶基因GdTPS的克隆及对温度胁迫的响应

作者 路标  谭瑶  周晓榕  邢莉  庞保平 

作者单位 内蒙古农业大学草原昆虫研究中心  内蒙古科学技术研究院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2017年12期

年份 2017 

分类号 S812.6 

关键词 沙葱萤叶甲  海藻糖合成酶  基因克隆  温度胁迫  实时荧光定量PCR 

文摘内容 【目的】海藻糖合成酶(trealose-6-phosphate synthase,TPS)是海藻糖合成过程中的关键酶之一。本研究旨在克隆沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖合成酶基因,分析其对不同温度胁迫的响应,以期进一步揭示沙葱萤叶甲耐温性的分子调控机制。【方法】通过RACE技术克隆沙葱萤叶甲TPS基因的全长cDNA序列,并对该基因进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR方法检测TPS基因在不同温度下沙葱萤叶甲2龄幼虫中的表达量变化。【结果】克隆获得沙葱萤叶甲TPS基因,将其命名为GdTPS(Gen Bank登录号:KY460114),该基因全长2 706 bp,开放阅读框(ORF)长2 496 bp,编码831个氨基酸;蛋白预测分子量为94.05 kD,等电点为6.82,无信号肽和跨膜结构,包含3个N-糖基化位点。GdTPS有两个保守功能区,与其他昆虫TPS具有较高的同源性,其中与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata TPS亲缘关系最近,氨基酸序列一致性为88%。实时荧光定量PCR结果表明,温度低于25℃(对照)时,GdTPS表达量随着温度下降而上升,-10℃时达到最高值;高于25℃时,GdTPS表达量随着温度上升而上升,40℃时达到最高值。【结论】沙葱萤叶甲幼虫通过上调GdTPS的表达来应对高温和低温胁迫,该结果为揭示TPS在昆虫应对温度胁迫过程中作用的分子机制提供了基础。