多重PCR方法检测锦鲤疱疹病毒基因

编号 zgly0001400917

文献类型 期刊论文

文献题名 多重PCR方法检测锦鲤疱疹病毒基因

作者 乌日琴  陈芳  张艺宜  刘芸莉  刘中勇  林志雄 

作者单位 广东出入境检验检疫局技术中心  华南农业大学动物科学系 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2011年11期

年份 2011 

分类号 S943 

关键词 检测  锦鲤疱疹病毒  多重PCR 

文摘内容 根据对已报道的PCR检测方法灵敏性评价,以常用KHV病毒PCR检测的目的基因KHVSphI片段(AY568590)、KHV5/9(AF411803)和KHVTK基因(AJ535112)作为靶基因,设计并选择3对特异性引物建立的多重PCR检测体系用于KHV病毒多基因的检测。本研究建立的多重PCR体系具有较高的特异性,能够特异性扩增出KHVSphI片段290bp、KHV5/9片段484bp和KHVTK基因片段409bp,对锦鲤和鲤鱼的另外一种病毒性病原鲤春毒血症病毒检测结果为阴性。多重KHV病毒PCR体系检测KHVSphI、KHV5/9和KHVTK基因片段单一模板的检测下限分别为:10fg、100fg和100fg,在相同模板浓度的情况下,KHVSphI、KHV5/9和KHVTK基因片段同时被检出的检测下限为100fg。对KHV病毒感染组织的检测结果表明,多重KHV病毒PCR检测结果与常规PCR检测结果基本吻合,在多重PCR检测体系中KHVTK基因片段检测的灵敏度高于检验检疫行业标准方法。结果表明,多重KHV病毒PCR检测方法能够快速、准确和灵敏地检测KHV病毒基因。