致病性副溶血弧菌三重PCR检测方法的建立和评价

编号 zgly0001487892

文献类型 期刊论文

文献题名 致病性副溶血弧菌三重PCR检测方法的建立和评价

作者 何再平  王权  陈永军  刘迎春  韩先干  王少辉  白雪瑞  刘永杰  蒋蔚 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所  南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S941.4 

关键词 副溶血弧菌  种特异性基因  溶血素基因  多重PCR  检测 

文摘内容 根据副溶血弧菌种特异性基因(tox R)、耐热直接溶血素基因(tdh)和相对耐热直接溶血素基因(trh)为靶基因分别设计引物,进行PCR扩增及反应条件的优化,建立了检测含有溶血素毒力基因的致病性副溶血弧菌的多重PCR方法。3对引物能分别特异性地扩增出368、269、486 bp的目的片段。副溶血弧菌均能扩增出tox R基因,不含溶血素基因的菌株(tdh-/trh-)仅扩增出1条目的片段,而含不同溶血素基因的致病性副溶血弧菌则分别扩增出2条(tdh+/trh-或tdh-/trh+)和3条(tdh+/trh+)特异性条带。检测其他非副溶血弧菌的供试菌,则不出现任何扩增条带。人工模拟样品检测结果显示对致病性副溶血弧菌的最低检测浓度为103CFU/m L。结果表明该多重PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏性,对检测致病性副溶血弧菌有重要意义。