生防链霉菌gCLA4遗传转化体系的建立与优化

编号 zgly0001533278

文献类型 期刊论文

文献题名 生防链霉菌gCLA4遗传转化体系的建立与优化

作者 徐萌萌  张红  何姣  涂璇  颜霞  黄丽丽 

作者单位 西北农林科技大学生命科学学院  旱区作物逆境生物学国家重点实验室  西北农林科技大学理学院  三峡大学生物与制药学院  西北农林科技大学植物保护学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2016年10期

年份 2016 

分类号 S476 

关键词 生防链霉菌gCLA4菌株  接合转移  遗传转化  质粒pSET152 

文摘内容 【目的】建立生防菌淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendularectus)gCLA4的遗传转化体系,为定向改造基因、提高基因表达水平及其生防分子机制研究奠定基础。【方法】以具有安普霉素(Apramycin)抗性基因标记的整合型质粒pSET152为出发质粒,Escherichia coli ET12567(pUZ8002,pSET152)为供体,淡紫灰链霉菌gCLA4为受体进行接合转移试验,并对影响接合效率的培养基、热激温度、接合转移时间和筛选转化子培养基等因素进行优化。【结果】成功地将质粒pSET152转入到了生防链霉菌gCLA4中,明确了可用于筛选链霉菌gCLA4转化子的抗生素为安普霉素或四环素;链霉菌gCLA4孢子50℃热激时转化效率较高,接合效率在16,18,20h下没有明显差异,MS培养基作为接合转移培养基时转化效率最高,接合产物涂布到高氏一号抗性培养基上进行阳性转化子筛选的效果最好。【结论】建立了生防链霉菌gCLA4的遗传转化优化体系。