当归苯丙氨酸解氨酶基因片段克隆和组织特异性表达分析

编号 zgly0001624772

文献类型 期刊论文

文献题名 当归苯丙氨酸解氨酶基因片段克隆和组织特异性表达分析

作者 雒军  王引权  温随超  李静  张金林  夏琦 

作者单位 甘肃中医学院药学院  甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室  兰州大学草地农业科技学院 

母体文献 草业学报 

年卷期 2014年04期

年份 2014 

分类号 S567.239 

关键词 当归  苯丙氨酸解氨酶基因  基因克隆  荧光定量PCR  基因表达 

文摘内容 苯丙氨酸解氨酶(PAL)在高等植物苯丙烷类代谢中具有重要作用,与植物体内很多重要的次生代谢产物的合成密切相关。当归主要药效成分阿魏酸是苯丙烷类代谢途径中的产物之一。为了探究阿魏酸生物合成和积累的机理,本研究克隆了当归苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)部分序列,运用荧光定量PCR方法分析该基因在当归不同组织部位的表达差异。根据已经克隆的植物PAL保守序列设计一对扩增引物,以当归叶片总RNA为模板,采用反转录PCR(RT-PCR)方法扩增出PAL片段并连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌DH5α,阳性克隆经PCR检测后测序,得到一段706bp的序列(登录号:KJ000258),内含终止密码子TAA,编码232个氨基酸,与GenBank中注册的伞形科植物珊瑚菜等6个物种的PAL核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性都在80%以上;运用SYBR Green荧光定量PCR方法,以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因,检测PAL在当归不同组织中的表达量,结果显示PAL在叶片中表达量最高,其次是茎和根,叶片和茎中表达量分别是根中表达量的7.5和2.7倍。