含双边界序列植物双价表达载体的构建

编号 zgly0001304217

文献类型 期刊论文

文献题名 含双边界序列植物双价表达载体的构建

作者 孔维文  邓仲香  王倩  唐克轩  张健 

作者单位 复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室  复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室  复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室  复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室  上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心 上海  200433  上海  200433  上海  200433  上海  200433  上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心  上海  200030  上海  200030 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2005年06期

年份 2005 

分类号 Q943.2 

关键词 共转化  无选择标记  半夏凝集素基因(PTA)  马铃薯高赖氨酸蛋白基因(SB401) 

文摘内容 转基因植物的安全性是基因工程改良作物的一个重要问题。构建含双边界序列(双T-DNA区)载体,将选择标记基因和目标外源基因分开在不同的T-DNA区,通过转基因植株有性杂交及后代分离,可在转基因后代中获得无选择标记的转基因安全植株。将2个外源基因置于同一载体上,可以提高其共转化的效率。本研究构建了1个中间载体pAHC17-PTA和1个含双边界序列的植物双价表达载体pDB13PS。pAHC17-PTA含有由Ubiquitin启动子引导的具有抗虫效果的半夏凝集素基因(PTA)。pDB13PS含2个独立的T-DNA区,在其中一个T-DNA区,含两个目的基因的完整的表达盒,一个是由Ubiquitin启动子引导的半夏凝集素基因(PTA),另一个是由水稻胚乳特异表达启动子(Glutelin-B1promoter)驱动的马铃薯高赖氨酸蛋白基因的cDNA(SB401)。pDB13PS的成功构建,为提高PTA和SB401的共转化效率和获得无选择标记的转基因后代植株奠定了基础。