基于锦绣杜鹃花蕾转录组的SSR标记开发及应用

编号 zgly0001670915

文献类型 期刊论文

文献题名 基于锦绣杜鹃花蕾转录组的SSR标记开发及应用

作者 王书珍  张羽佳  黄诗颖  罗炎炎  金正强  李志良  金卫斌 

作者单位 大别山特色资源开发湖北省协同创新中心  黄冈师范学院生命科学学院 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2019年03期

年份 2019 

分类号 S685.21 

关键词 锦绣杜鹃  转录组测序  微卫星  遗传多样性  跨物种扩增 

文摘内容 [目的]探究锦绣杜鹃（Rhododendron pulchrum Planch.） EST-SSR的类型、分布频率和分布特征,开发有效的SSR标记,并验证其在遗传多样性研究和跨物种转移中的应用潜力。[方法]采用RNA-seq技术对锦绣杜鹃‘紫鹤’品种的花蕾进行转录组测序,MISA软件对组装的unigenes内部的SSR位点进行检索,分析其类型、分布频率。利用Primer 3.0软件设计引物,并对锦绣杜鹃群体和其近缘种映山红群体进行多样性检测,利用POPGENE-PC 2.2软件计算等位基因数、有效等位基因数、多态性位点百分率、Shannon’s信息指数、Nei氏多样性指数、观察杂合度、期望杂合度等参数。[结果]锦绣杜鹃‘紫鹤’花蕾转录组共有49 527个unigenes（43 766 249 bp）,从中筛选出16 120个SSR位点（24.46%）,发生频率为1·（2.7 kb）-1。微卫星的重复次数主要集中在5～24次之间,二核苷酸发生频率最高（9 624个,59.70%）,其次是单核苷酸（3 738个,23.19%）,频率最低的为五核苷酸（42个,0.26%）。频率最高的重复基序有A/T、AG/CT、AAG/CTT、AGG/CCT、ACC/GGT、AGC/GCT、AAAG/CTTT、AAGAG/CTCTT、AGAGGG/CCCTCT等。选用13个多态性SSR标记对锦绣杜鹃群体进行PCR扩增,共得到71个等位基因,平均每个位点3～9个;有效等位基因数在各SSR位点之间变化范围为1.684～5.930;观察杂合度HO和期望杂合度HE的变化范围分别为0.000～1.000和0.433～0.848,平均值分别为0.696±0.426和0.705±0.129;Shannon’s信息指数I和Nei氏多样性指数h的变化范围分别为0.736～1.961和0.406～0.831,平均值分别为1.376±0.339和0.683±0.131。此13个标记在映山红群体中的跨物种扩增成功率为100%,并反映出丰富的遗传多样性。2个群体间的遗传差异93.4%存在于群体内部。[结论]基于AG/CT重复基序开发的13个SSR标记具有高度的多态性,为后续杜鹃花属植物的遗传多样性研究、遗传图谱构建、基因定位、分子标记辅助育种等研究奠定了基础。大别山野生映山红资源具有较高的遗传多样性,且杂合度过剩,遗传变异主要发生在群体内部。