紫花苜蓿ISSR—PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0000519847

文献类型 期刊论文

文献题名 紫花苜蓿ISSR—PCR反应体系的建立与优化

作者 王瑜  袁庆华 

作者单位 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 

母体文献 草地学报 

年卷期 2007,15(3)

页码 212-215

年份 2007 

分类号 S812  Q943 

关键词 紫花苜蓿  ISSR  PCR反应体系  优化 

文摘内容 通过优化影响紫花苜蓿(Medicago sativa L．)ISSR—PCR的主要参数，建立适于紫花苜蓿的ISSR反应体系和扩增程序。在20μL体系中各反应物的最适含量为：15ng模板DNA，0．2mmol／LdNTP，0．4μmol／LISSR引物，0．8U Taq DNA聚合酶，2μL 10×PCR Buffer，1．5mmol／L MgCl2，2．5％去离子甲酰胺。PCR扩增程序为：94℃预变性4min，94℃变性30s，62℃(62℃～58℃)退火45s，72℃延伸1min45s，共11个循环，每个循环退火温度降1℃；94℃变性30s，52℃(52℃～48℃)退火45s，72℃延伸1min45s，共24个循环；72℃延伸5min，25℃保温。