白羊草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001422913

文献类型 期刊论文

文献题名 白羊草ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 李钰莹  董宽虎  王若梦  杨静芳 

作者单位 山西农业大学动物科技学院 

母体文献 中国草地学报 

年卷期 2012年04期

年份 2012 

分类号 S543 

关键词 白羊草  ISSR  PCR反应体系  优化 

文摘内容 采用正交试验与单因素、双因素设计结合的方法,对白羊草ISSR-PCR反应体系的Mg2+、dNTP、模板DNA、Taq DNA聚合酶及引物5种主要因素进行优化。确立了白羊草最佳反应体系及扩增程序:25μL体系中dNTP 0.2mmol/L、Taq酶1.0U、引物0.6μmol/L、Mg2+2.5mmol/L、DNA模板30ng、10×PCR Buffer 2.5μL;扩增程序:94℃预变性5min,94℃变性45s,50～60℃(退火温度随引物不同而定)退火60s,72℃延伸90s,共35个循环,72℃后延伸5min。