葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立

编号 zgly0001420143

文献类型 期刊论文

文献题名 葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立

作者 范旭东  董雅凤  张尊平  任芳  李亚惠 

作者单位 中国农业科学院果树研究所国家落叶果树脱毒中心 

母体文献 园艺学报 

年卷期 2012年05期

年份 2012 

分类号 S436.631 

关键词 多重RT-PCR  检测  葡萄卷叶伴随病毒3  沙地葡萄茎痘病毒  葡萄病毒B  葡萄病毒A 

文摘内容 以复合感染4种病毒的‘红地球’(Red Globe)葡萄样品为试材,对影响多重PCR的dNTPS浓度、Taq酶浓度、引物浓度、退火温度及模板量进行了调整和优化,建立了能同时检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leafroll-associated virus-3,GLRaV-3)、沙地葡萄茎痘相关病毒(Grapevine rupestris stem pitting associated virus,GRSPaV)、葡萄病毒B(Grapevine virusB,GVB)和葡萄病毒A(Grapevine virusA,GVA)的多重RT-PCR方法。灵敏度测验结果显示,多重RT-PCR与单一RT-PCR检测灵敏度基本一致。多重RT-PCR获得的特异性片段大小分别为905、546、460和196bp,经过克隆、测序及序列比对,表明其序列与已报道的病毒序列具有较高的同源性。对7个已知带病毒的葡萄样品进行检测验证的结果表明,所建立的多重RT-PCR技术可用于大量田间样品中这些病毒的检测。