利用正交法确定测定意大利蜜蜂幼虫细胞色素P450O-脱乙基活性最佳反应条件

编号 zgly0001399625

文献类型 期刊论文

文献题名 利用正交法确定测定意大利蜜蜂幼虫细胞色素P450O-脱乙基活性最佳反应条件

作者 唐晓伟  高希武  刁青云 

作者单位 中国农业科学院蜜蜂研究所  中国农业大学昆虫学系 

母体文献 应用昆虫学报 

年卷期 2011年05期

年份 2011 

分类号 S891 

关键词 意大利蜜蜂  细胞色素P450О-脱乙基活性  正交试验  荧光分光光度法  最佳条件 

文摘内容 荧光分光光度法检测意大利蜜蜂Apismellifera ligustica Spinol细胞色素P450О-脱乙基活性方便快捷、较灵敏,以7-乙氧基香豆素为底物,通过测定其产物7-羟基香豆素的荧光变化来确定细胞色素P450О-脱乙基的活性。在利用荧光分光光度法检测意大利蜜蜂幼虫细胞色素P450О-脱乙基活性过程中,反应体系pH值、反应时间、反应温度对实验结果影响较大,本实验在确定最佳底物终浓度和辅酶NADPH终浓度的前提下用正交法研究了pH值、反应时间、反应温度3个因素对意大利蜜蜂细胞色素P450О-脱乙基活性的影响。极差分析和方差分析表明,3个因素对实验结果影响大小顺序为:时间>温度>pH值,并且得到最佳组合条件为:反应时间20min、温度40℃及pH值7.8。