正交试验法确定测定意大利蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶反应的最佳条件

编号 zgly0001298753

文献类型 期刊论文

文献题名 正交试验法确定测定意大利蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶反应的最佳条件

作者 张莹  黄建  高希武 

作者单位 福建农林大学植物保护学院  福建农林大学植物保护学院  中国农业大学昆虫学系 福州350002  中国农业大学昆虫学系  北京100094  福州350002  北京100094 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2005年04期

年份 2005 

分类号 S893.3 

关键词 蜜蜂  乙酰胆碱酯酶  正交试验  方差分析  最佳条件 

文摘内容 用正交试验法研究了酶浓度、底物浓度、反应体系的pH值、反应温度和反应时间5个因素对测定意大利蜜蜂ApismelliferaligusticaSpinola头部乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,并从试验组合中选出最佳条件。蜜蜂AChE活性的测定采用Gorun(1978)改进的Ellman方法,以碘化硫代乙酰胆碱(ATCI)为底物,5,5’-二硫双硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,测定反应物在412nm波长下的光密度值,用考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量,经计算得到蜜蜂头部AChE的比活力。对正交试验结果进行极差分析和方差分析,结果表明各因素对实验结果影响的大小顺序为:温度>pH值>时间>酶浓度>底物浓度。并得出测定蜜蜂头部AChE活性的最佳条件是:酶终浓度0.2头/mL、底物终浓度0.8mmol/L、pH值7.5、温度40℃及反应时间5min。