编号
zgly0000441840
文献类型
期刊论文
文献题名
部分柿属植物IRAP反应体系的建立和指纹图谱构建
作者单位
华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室
母体文献
农业生物技术学报
年卷期
2006,14(6)
页码
931-936
年份
2006
分类号
S188
关键词
反转录转座子
IRAP-PCR
技术体系
指纹图谱
文摘内容
为建立柿属(Diospyros)植物反转录转座子间扩增多态性(IRAP)技术体系, 对IRAP分析中影响PCR扩增结果的若干因子进行了研究。确立了适合柿属植物IRAP分析的技术体系: 20μL反应体系中, 1×Buffer、模板DNA 50ng、Mg^2+2.0mmol/L、dNTPs 0.25mmol/L、引物0.40μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0U, 矿物油20μL; PCR扩增程序: 95℃ 5min; 95℃ 1min.56℃ 1min, 升温速率+0.6℃/s, 72℃2min, 循环44次; 72℃延伸8min。该优化体系在7种柿属植物33个基因型的IRAP分析中获得较理想的扩增结果, 扩增片段120-1500bp, 不同种和柿种以下不同品种间扩增条带总数和带谱相同。每个基因型都有其独特的指纹图谱, 可作为区分不同基因型的依据, 尤其芽变品种的鉴别。