牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的表达及多克隆抗体制备

编号 zgly0001449003

文献类型 期刊论文

文献题名 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的表达及多克隆抗体制备

作者 杨有武  杨有德 

作者单位 青海省海北州海晏县兽医站  青海大学畜牧兽医科学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年09期

年份 2013 

分类号 S852.659.6 

关键词 牛病毒性腹泻病毒  E2蛋白  表达  多克隆抗体 

文摘内容 为高效表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白并制备多克隆抗体,参考牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因组序列设计一对引物,利用RT-PCR扩增出822bp的E2基因片段,经测序鉴定正确后,将其定向克隆至原核表达载体pET32a(+)中,鉴定正确后,在大肠埃希菌BL21(DE3)细胞内得到了以包涵体表达形式存在的重组融合蛋白,重组蛋白亲和层析纯化后,免疫印迹鉴定表明重组蛋白能够被牛病毒性腹泻病毒阳性血清特异性识别,具有良好的反应活性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,间接ELISA测定其抗体效价达1∶25 600。本研究所表达的E2蛋白及制备的多克隆抗体,为E2蛋白结构、功能的研究以及抗原表位的鉴定奠定了基础,为进一步开发牛病毒性腹泻病毒快速检测试剂提供了条件。