刺槐EST-SSR标记PCR反应体系的优化

编号 zgly0000905682

文献类型 期刊论文

文献题名 刺槐EST-SSR标记PCR反应体系的优化

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 赵克奇  董黎  王少明  孙宇涵  孙文婷  袁存权  荀守华  张江涛  王玉玲  李云 

作者单位 林木育种国家工程实验室/北京林业大学生物科学与技术学院  国有洛宁县吕村林场  山东省林业科学研究院  河南省林业科学研究院  北京风沙源育苗中心 

母体文献 中国农学通报 

年卷期 2014(22)

页码 45-52

年份 2014 

关键词 刺槐  EST-SSR  PCR反应体系 

文摘内容 为建立一套适用于刺槐EST-SSR标记的PCR反应体系,采用L16(45)正交试验设计结合单因素试验,对刺槐EST-SSR PCR反应体系中的5个主要因素:引物、DNA模板、dNTPs、Mg2+和Taq DNA聚合酶进行优化试验。结果表明:在20μL反应体系中,各反应因素的最佳水平为0.5μmol/L引物、30 ng模板DNA、0.15 mmol/L dNTP、0.5 mmol/L Mg2+、1.0 UTaq DNA聚合酶。利用随机挑选的3个刺槐优良无性系品种和7对EST-SSR引物对优化体系进行验证,结果均能获得稳定、清晰的条带,证明该体系稳定可靠。