忽地笑CYP98A的分子克隆与表达分析

编号 zgly0001639728

文献类型 期刊论文

文献题名 忽地笑CYP98A的分子克隆与表达分析

作者 钱彬彬  李宜奎  李洁  程丽  夏冰  汪仁 

作者单位 江苏省中国科学院植物研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年11期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S567.219 

关键词 忽地笑  CYP98A  分子克隆  亚细胞定位  原核表达 

文摘内容 利用RACE技术从忽地笑(Lycoris aurea(L’Hér.)Herb.)花葶中克隆获得细胞色素P450酶98A亚家族蛋白编码基因LaCYP98A。该基因cDNA全长1 794 bp,开放阅读框为1 518 bp,编码含有505个氨基酸残基的LaCYP98A蛋白。LaCYP98A具有细胞色素P450酶特征性的亚铁血红素结合结构域和半胱氨酸残基组成的活性中心。LaCYP98A与拟南芥、大豆等其他植物CYP98A氨基酸序列的一致性在60%以上,且具有CYP450的所有特征模序。LaCYP98A定位于植物细胞的内质网,其N-端29个氨基酸对于其亚细胞定位具有重要的作用。利用pET表达系统,通过截掉其N-端内质网定位区域,可以实现LaCYP98A在大肠杆菌中的诱导表达。本研究为LaCYP98A的功能鉴定和植物细胞色素P450的原核表达及其催化的次级代谢产物的异源合成奠定了基础。