编号
zgly0001380045
文献类型
期刊论文
文献题名
北柴胡鲨烯合酶基因及其编码区cDNA克隆与序列分析
作者单位
中国医学科学院
北京协和医学院药用植物研究所
东北林业大学生命科学院
母体文献
园艺学报
年卷期
2010年02期
年份
2010
分类号
S567.79
关键词
北柴胡
柴胡皂苷
鲨烯合酶基因(SS)
RT-PCR
PCR
文摘内容
鲨烯合酶(EC.2.5.1.21,squalene synthase,SS)是植物甾醇和三萜化合物生物合成途径中的关键酶。为研究鲨烯合酶在柴胡皂苷生物合成中的作用,以北柴胡(Bupleurum chinense DC.)不定根为试材,采用Trizol法提取总RNA,利用RT-PCR方法从北柴胡中扩增出了鲨烯合酶cDNA特异片段,并进行了克隆、测序。测序结果显示得到了两个序列不同的cDNA(BcSS1和BcSS2),分别为1245bp和1248bp,分别编码414及415个氨基酸。BcSS1和BcSS2间的核苷酸和氨基酸一致性分别为98%和96%。NCBI Blastx结果显示与三岛柴胡和三七SS氨基酸序列相似性最高,BcSS1的一致性分别为99%和90%,BcSS2的分别为97%和87%。在此基础上,利用PCR技术从北柴胡不定根中扩增得到了一个SS基因克隆,长5880bp,包含12个内含子。