感染强、弱PRRSV毒株的Marc-145细胞差异基因文库的构建

编号 zgly0001394583

文献类型 期刊论文

文献题名 感染强、弱PRRSV毒株的Marc-145细胞差异基因文库的构建

作者 张磊  韩明远  王建华  宁宜宝  陈坚 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院  中国兽医药品监察所 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2011年07期

年份 2011 

分类号 S852.651 

关键词 PRRSV  Marc-145  差异基因文库  细胞培养 

文摘内容 【目的】用强、弱PRRSV GD株传代毒株感染Marc-145细胞,构建Marc-145细胞的差异基因cDNA文库。【方法】以感染PRRSV GD株第100代弱毒株的Marc-145 cDNA为测试组(Tester),以感染PRRSV GD株第5代强毒株的Marc-145 cDNA为对照组(Driver),采用抑制性消减杂交方法,构建强、弱PRRSV GD株感染的Marc-145细胞差异基因cDNA文库,并使用LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)技术对试验结果进行验证。【结果】经4次抑制性消减杂交重复试验,得到S8、S29、L6、L26及L30等5个稳定差异表达的基因。LAMP结果显示,S8、S29、L6、L26及L30均为差异表达基因,这与抑制性消减杂交结果吻合。【结论】成功构建了感染强、弱PRRSV毒株的Marc-145细胞差异基因文库,为研究S8、S29、L6、L26和L30基因与PRRSV感染体外培养细胞Marc-145的关系奠定了基础。