猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2～4特异siRNA的筛选及其抑制病毒复制效果的研究

编号 zgly0000520781

文献类型 期刊论文

文献题名 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2～4特异siRNA的筛选及其抑制病毒复制效果的研究

作者 贺云霞  华荣虹  周艳君  安同庆  仇华吉  王云峰  童光志 

作者单位 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 

母体文献 生物工程学报 

年卷期 2007,23(5)

页码 794-800

年份 2007 

分类号 Q959.9 

关键词 RNA干扰  小干扰RNA  短发夹RNA  PRRSV 

文摘内容 RNA干扰(RNAi)技术是基因功能研究的有效工具,为了了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)次要结构蛋白GP2、GP3、GP4在病毒复制中的作用,针对各自的编码基因ORF2、ORF3、ORF4分别选取4个小干扰RNA(siRNA)位点(共12个),构建相应的短发夹RNA(shRNA)表达载体,转染MARC-145细胞后,通过荧光定量PCR和病毒滴度检测干扰效果。筛选了可以减少GP2、GP3、GP4相应基因mRNA含量的ORF2、ORF3、ORF4特异shRNA表达载体,病毒效价滴定表明shRNA表达载体处理细胞可以减少GP2、GP3、GP4相应基因mRNA含量,细胞培养上清中的病毒滴度比对照低184~4.65倍。