碱性果胶酯裂解酶工程菌的构建

编号 zgly0000446594

文献类型 期刊论文

文献题名 碱性果胶酯裂解酶工程菌的构建

作者 诸葛斌  堵国成  沈微  陈坚 

作者单位 江南大学生物工程学院环境生物技术研究室/工业生物技术教育部重点实验室 

母体文献 应用与环境生物学报 

年卷期 2006,12(4)

页码 547-549

年份 2006 

分类号 TQ925.3 

关键词 碱性果胶酯裂解酶  基因  表达 

文摘内容 从本研究室筛选的Bacillus subtilis WSHB04-02菌株中扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的结构基因PL, 将其插入大肠杆菌分泌表达载体pET22b(+)多克隆位点, 得到重组载体pET22b(+)PL.序列分析表明, 所获PL基因与已报道的B.subtilis SO113的PL基因的同源性为98%.重组载体在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达。SDS-PAGE分析显示, 表达产物的分子量(Mr)均为43×10^3, 同核酸序列测定所推导的值相符。该工程菌经IPTG诱导后, 胞内酶活为8U/mL研究发现, 碱性果胶酯裂解酶不仅在胞内有酶活, 胞外也有酶活, 说明所构建的表达体系可使该酶向胞外分泌。