编号 zgly0001400526
文献类型 期刊论文
文献题名 空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫原性分析
作者 祝长青 唐泰山 王婷 蒋原 姚火春 张常印 薛峰 栾军
作者单位 江苏出入境检验检疫局 南京农业大学动物医学院 河南科技大学动物科技学院
母体文献 动物医学进展
年卷期 2011年09期
年份 2011
分类号 S852.61
关键词 空肠弯曲菌 peb1A 原核表达 免疫原性
文摘内容 根据空肠弯曲菌基因序列设计引物,以菌株ATCC 29428为模板扩增出peb1A基因片段,定向克隆至pMD18-T载体中,并对克隆片段测序,比较所测序列与不同来源弯曲菌的同源性;用软件改造并合成peb1A基因78 bp~780 bp区间片段,PCR扩增后,构建出表达载体pET-28a(+)-peb1Ag,转化至E.coliBL21(DE3)后诱导表达,纯化后获得重组蛋白PEB1;将其进行Western blot分析、小鼠免疫试验。结果表明,克隆的peb1A基因序列与报道的NCTC 11168核苷酸同源性为98.1%,改造表达后的重组蛋白PEB1具有良好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠后血清效价达1∶12 800,为空肠弯曲菌保护性抗原的研究和单克隆抗体的筛选奠定了基础。