应用32P标记核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒的研究初报

编号 zgly0001087859

文献类型 期刊论文

文献题名 应用32P标记核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒的研究初报

作者 吴时友  吴明杰  宫云浩 

作者单位 农牧渔业部动物检疫所  农牧渔业部动物检疫所 

母体文献 动物检疫 

年卷期 1987年04期

年份 1987 

关键词 核酸探针  DNA  病毒核酸  硝基纤维素  核酸片段  单链核酸  传染性喉气管炎  猪伪狂犬病  鸡马立克病  打点杂交 

文摘内容 本文在我国首次报道应用核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）。经培养、纯化IBRV,抽提IBRV全基因组DNA,用缺口翻译法标记上32P,在硝酸纤维膜上进行打点杂交。试验结果表明,采用32P标记的核酸探针,可检测出10Pg的IBRV—DNA,能明显区别IBRV感染细胞和未感染的正常细胞,具有相当高的灵敏度和特异性,同Dorman报道的结果相似。 应用核酸探针检测病毒核酸的技术,近年来有了突破性的进展,有的国外学者称之为第四代检测技术。其基本原理是利用放射性同位素标记的DNA或RNA（即核酸探针）与固定在硝基纤维素膜上或玻片上的单链核酸进行杂交,经过放射自显影,在X光片或感光乳胶中可看到特定的核酸片段的踪迹。由于这一技术具有灵敏度高,特异性强的优点,在医学临床诊断中已显示出它的优越性,文献报道日趋见多。在动物病毒研究方面已见到了用核酸探针检测蓝舌病,牛传染性鼻气管炎鸡马立克病,猪伪狂犬病、犬瘟热、传染性喉气管炎等病毒感染的报道。 Dorman,M,A在1985年首先报道了利用生物素标记的IBRV—DNA的HindⅢ酶切片段可检测出10pg(10-11g)IBRV—DNA。随后,Dunn,D.C和Pacciarini,L以及Brunner,D也相继作了报道。我们用32P标记的IBRV—DNA全基因组做为核酸探针,进行了一系列的研究,初步结果表明,我们