猪伪狂犬病病毒gD和gE蛋白间接ELISA检测方法的建立及联合应用

编号 zgly0001746970

文献类型 期刊论文

文献题名 猪伪狂犬病病毒gD和gE蛋白间接ELISA检测方法的建立及联合应用

作者 林东文  王宝琴  张艳  刘博  王文秀 

作者单位 福建省龙岩市新罗区农业农村局  滨州学院生物与环境工程学院  海南省热带动物繁育与疫病研究重点实验室  山东省滨州畜牧兽医研究院 

母体文献 家畜生态学报 

年卷期 2022,43(11)

页码 67-73

年份 2022 

分类号 S852.651 

关键词 猪伪狂犬病  间接ELISA  野毒抗体  免疫抗体 

文摘内容 为建立一种能够快速鉴别检测猪伪狂犬病毒(PRV)疫苗免疫抗体和野毒抗体的方法,分别对PRV的gD蛋白和gE蛋白进行原核表达,以其重组蛋白作为检测抗原分别建立了gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法,并联合应用两种检测方法对临床血清样品进行检测。结果表明:获得了以包涵体形式表达的重组gD蛋白和重组gE蛋白,经Western blot检测表明两种重组蛋白均具有良好的免疫学活性;gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法检测PRV阳性血清的最低检出效价分别为1:25600和1:12800,gD-间接ELISA方法检测PRRSV、CSFV、PPV、PCV-2、PEDV、TGEV阳性血清均为阴性;gE-间接ELISA方法检测PRV疫苗免疫血清以及PRRSV、CSFV、PPV、PCV-2、PEDV、TGEV阳性血清均为阴性;建立的gD和gE蛋白的两种间接ELISA方法的批内和批间重复性试验的变异系数分别小于5%和7%;联合应用gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法检测2156份临床血清样品,PRV抗体阳性率为88.96%,PRV野毒抗体阳性率为4.04%,PRV免疫抗体阳性率为84.93%。说明建立的gD-间接ELISA方法和gE-间接ELISA方法均具有良好的敏感性、特异性、重复性,两种方法的联合应用实现了PRV免疫抗体和野毒抗体的鉴别检测。